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倒置荧光显微镜的特点和使用
来源:技术文章    更新时间:2023-05-11    浏览:998次
倒置荧光显微镜,是指与一般显微镜相比,其物镜、聚光镜和光源的位置都颠倒过来,由荧光附件与显微镜有机结合构成的显微镜。激发光从物镜向上落射到标本表面,被反射到物镜中并聚集在样品上,样品所产生的荧光以及由物镜透镜表面、盖玻片表面反射的激发光同时进入物镜,经双色束分离器使激发光和荧光分开而成像。
 
倒置显微镜具有在培养瓶或培养皿内进行显微观察的特点;可以观察不经染色的透明活体;落射荧光显微适用于荧光显微术。该仪器特别适用于对活体细胞和组织、流质、沉淀物等进行显微研究,是生物学,细胞学,肿瘤学,遗传学,免疫学等研究工作的理想仪器。可供科研、高校、医疗、防疫和农牧等部门使用。
 
倒置荧光显微镜的功能之一是荧光观察,其基本原理是利用激发光激发样本产生荧光,从而实现样本的形状与定位观察,主要适用于荧光标记样本的观察。荧光观察是倒置荧光显微镜的重要功能,其配件昂贵且使用特殊。要想医学研究生正确地掌握荧光观察的操作使用规范,教师除了教会他们掌握基本的操作方法,同时更为重要的是教会他们掌握它的特殊性。首先,在标本制作中,载玻片和盖玻片应表面光洁且厚度适宜(载玻片在0.8mm~1.2mm之间,盖玻片在0.17mm左右);标本应厚度适宜,同时避免细胞重叠或杂质掩盖;封裱剂应使用甘油和碳酸盐缓冲液(0.5mol/L PH9.0~9.5)的等量混合液。其次,在荧光观察前,应关闭房间内的电灯和倒置荧光显微镜的白光,确保处于暗室环境。最后,在荧光观察中,应严格控制观察时间,一般以1~2小时/次为宜,否则荧光会出现衰减和消失的现象;调整光源时应佩戴防护眼镜,避免紫外线对眼镜的伤害。

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